Приготування ряду поживних середовищ
Мясопептонний желатин (МТЖ) - середовище штучна, тверда, загального призначення. Це щільна живильне середовище, для приготування якої використовують сухий желатин. Желатин - речовина білкової природи, кислий азотвмісний продукт, що добувається шляхом виварювання кісток, хрящів. Для приготування МТЖ до 1 л МПБ додають 100- 150 г желатину, настоюють кілька годин для набухання желатину і потім нагрівають до його повного розчинення. Використовують луг для доведення реакції середовища до слаболужної. Фільтрують гарячу середу через складчастий паперовий фільтр, розливають в колби і стерилізують дрібно текучим паром в апараті Коха. Застосування МТЖ обмежена в зв'язку з тим, що він розріджується під дією протеолітичних ферментів, що виділяються багатьма мікроорганізмами. Крім того, утворений желатином гель плавиться вже при 23-25 ºС і застигає при 20 ºС і нижче, а більшість мікробів розвивається при 30-37 ºС. Використовують для виявлення культуральних і біохімічних ознак ідентифікованих мікроорганізмів.
Крохмале-аміачний агар (КАА) - середовище синтетична, твёр-дая, елективна. Має такий склад, г: крохмаль - 10, (NH 4) 2 SO 4 - 2, K 2 HPO 4 - 1, MgSO 4 - 1, CaCO 3 - 3, агар-агар - 20, вода ДіСтено-ліровать - 1000 мл . Агар розчиняють в 300 мл води. Окремо розчиняють крохмаль в 100 мл води. В інших 600 мл води розчиняють солі, нагрівають до кипіння і в киплячий розчин при безперервному помішуванні вливають крохмаль, потім додають воду з агаром і стерилізують в автоклаві. Використовують для вирощування актиноміцетів.
Середа Чапека - середовище синтетична, тверда, елективна. Має такий склад, г: глюкоза - 14,0; CaCO 3 - 0,7; KNO 3 - 0,7; MgSO 4 - 0,35; NaCl - 0,35; K 2 HPO 4 - 0,35; FeSO 4 - сліди; агар-агар - 20,0; вода дистильована - 1000 мл. Агар окремо розчиняють в 300 мл води. Потім всю суміш кип'ятять, розливають в колби і стерилізують в автоклаві. Використовують для вирощування актиноміцетів.
Середовище Ендо - середовище синтетична, тверда, елективна. Має такий склад, г: пептони - 10, лактоза - 10, K 2 HPO 4 - 3,5, NaHSO 3 - 2,5, агар-агар - 15,0, вода дистильована - 1000 мл. До середи додають 4 мл 10% -ного спиртового розчину основного фуксину, тому вона забарвлюється в рожево-кремовий колір. Середовище стерилізують в автоклаві і зберігають в темряві. Використовують для вирощування кишкової палички. Бактерії з роду Escherichia на цьому середовищі утворюють малинові колонії з металевим блиском.
Пептонна вода - середовище штучна, рідка, елективна. Для її приготування до 1 л води додають 40 г пептона і 5 г NaCl. розчиняють при нагріванні, фільтрують, розливають в колби і автоклавують. Використовують для вирощування аммоніфіцірующіх (гнильних) бактерій.
Напіврідкий агар - середовище синтетична, напіврідка, загального призначення. Для її приготування 0,1 г агар-агар розчиняють в 100 мл води при кип'ятінні, фільтрують і автоклавують. Використовують для прямого підрахунку числа мікроорганізмів у грунті по Виноградському.
Багато поживні середовища (середа Ендо, сухий поживний агар, поживний бульйон і ін.) Виготовляються промисловим способом у вигляді сухих порошків. У лабораторії їх доводять до готовності за рецептом, вказаною на етикетці.
Приготування ряду елективних поживних середовищ описано в роботах № 11, 12, 13, 16, 17, 18, 19, 20, 21, 22, 23.
Матеріали та обладнання. колби з мясопептонний бульйоном, мясопептонний агаром, середовищем Чапека або КАА для актиноміцетів, середовищем Ешбі для азотобактера, середовищем Омелянського для целлюлозоразлагающіе бацил і ін .; сухий пептони, агар-агар і желатин в баночках.
Інші новини по темі: