Купити агар та інші поживні середовища вигідно в будь-якому обсязі
Живильне середовище - однокомпонентний або багатокомпонентний субстрат, застосовуваний для культивування мікроорганізмів або культур клітин вищих організмів.
Вимоги, що пред'являються до середах
- бути поживними. тобто містити в легко засвоюваному вигляді все речовини, необхідні для задоволення харчових і енергетичних потреб. При культивуванні ряду мікроорганізмів в середовища вносять фактори росту - вітаміни, деякі амінокислоти, які клітина не може синтезувати.
- мати оптимальну концентрацію водневих іонів - pH, так як тільки при оптимальній реакції середовища, що впливає на проникність оболонки, мікроорганізми можуть засвоювати живильні речовини.
Для більшості патогенних бактерій оптимальна слаболужна середу (pH 7,2-7,4). Виняток становлять холерний вібріон - його оптимум знаходиться в лужному зоні (pH 8,5-9,0) і збудник туберкульозу, що потребує слабокислою реакції (pH 6,2-6,8).
Щоб під час росту мікроорганізмів кислі або лужні продукти їх життєдіяльності не змінили pH, середовища повинні володіти буферностью. тобто містити речовини, що нейтралізують продукти обміну.
- бути Ізотонічність для мікробної клітини; тобто осмотичний тиск в середовищі повинно бути таким же, як всередині клітини. Для більшості мікроорганізмів оптимальне середовище, відповідна 0,5% розчину натрію хлориду.
- бути стерильними. так як сторонні мікроби перешкоджають росту досліджуваного мікроба, визначенню його властивостей і змінюють властивості середовища.
- щільні середовища повинні бути вологими і мати оптимальну для мікроорганізмів консистенцію.
- володіти певним окислювально-відновним потенціалом, тобто співвідношенням речовин, які віддають і приймають електрони, що виражається індексом RH2. Наприклад, анаероби розмножуються при RH2. не вище 5, а аероби - при RH2 не нижче 10.
- бути по можливості уніфікованим. тобто містити постійне кількість окремих інгредієнтів.
Бажано, щоб середовища були прозорими - зручніше стежити за ростом культур, легше помітити забруднення середовища сторонніми мікроорганізмами.
Класифікація
- За вихідними компонентами:
- натуральні середовища - готують з продуктів тваринного і рослинного походження (м'ясо, асцит, кісткове борошно, кормові дріжджі, згустки крові і ін.)
- синтетичні середовища - готують з певних хімічно чистих органічних і неорганічних сполук, взятих в точно зазначених концентраціях і розчинених в двічі дистильованої води.
- За консистенцією (ступеня щільності):
- рідкі (бульйони)
- напіврідкі
- щільні
Щільні і напіврідкі середовища відрізняються від рідких наявністю желирующего агента (агар-агар, рідше желатин). Крім того, в якості щільних середовищ застосовують коагульованої яєчні або сироваткові білки, картопля, середовища з силікагелем. Деякі мікроорганізми використовують желатин як поживна речовина - при їх зростання серед розріджується.
- За складом:
- прості: мясопептонний бульйон (МПБ), мясопептонний агар (МПА), живильний желатин,
- складні - багатокомпонентні середовища, які можуть містити амінокислоти, вітаміни, мікроелементи та інші речовини.
- За призначенням:
- основні - служать для культивування більшості мікроорганізмів, наприклад МПБ, МПА, бульйон, шоколадний агар, пептонна вода.
- спеціальні - служать для виділення і вирощування мікроорганізмів, які не ростуть на простих середовищах.
- елективні (виборчі) - служать для виділення певного виду мікробів, зростання яких вони сприяють, затримуючи або пригнічуючи зростання супутніх мікроорганізмів. Середовища стають елективних при додаванні до них певних антибіотиків, солей, зміни pH. Рідкі елективні середовища називають середовищами накопичення.
- диференційно-діагностичні - дозволяють відрізнити один вид мікробів від іншого по ферментативної активності.
- транспортні - призначені для первинного посіву та транспортування досліджуваного матеріалу.
приготування середовищ
Посуд для приготування середовищ
Посуд для приготування середовищ не повинна містити сторонніх речовин, наприклад лугів, що виділяються деякими сортами скла, або оксидів заліза, які можуть потрапити в середу при варінні її в іржавих каструлях. Краще користуватися скляному, емальованому або алюмінієвим посудом. Перед вживанням посуд необхідно ретельно вимити, прополоскати і висушити. Нову скляний посуд попередньо кип'ятять 30 хвилин в 1-2% розчині соляної кислоти, після чого протягом години прополіскують в проточній воді.
Початковою сировиною для приготування більшості середовищ служать продукти тваринного і рослинного походження, а також готові напівфабрикати.