Визначення резус-належності крові - стаття на - pda версія
ВИЗНАЧЕННЯ резус-ПРИЛАДДЯ КРОВІ ЗА ДОПОМОГОЮ СТАНДАРТНИХ СИРОВАТОК
ВИЗНАЧЕННЯ резус ПРИЛАДДЯ КРОВІ ЗА ДОПОМОГОЮ Цоліклони
6-7
ВИЗНАЧЕННЯ резус-ПРИЛАДДЯ КРОВІ ЗА ДОПОМОГОЮ СТАНДАРТНИХ СИРОВАТОК
Поняття резус-фактор - занадто загальне (і застаріле). Система резус антигенів різноманітна. Сучасні методи дослідження дозволяють робити тести індивідуально по резусу D, С, с, Е, е. Крім цього, необхідно виявляти випадки зі слабким D-антигеном або варіабільності D-антигеном. Вся ця інформація теж вкрай важлива при підборі донора в разі потреби.
Хід роботи. Визначення резус-належності крові проводиться за допомогою стандартної універсальної сироватки «антирезус» для всіх груп крові. В пробірку вводять одну краплю (0,05 мл) досліджуваної крові або еритроцитів і додають 1-2 краплі стандартного універсального реагенту «антирезус» тієї ж групи крові. Перешивають вміст шляхом струшування пробірки і поміщають її на водяну баню на 5 хвилин при температурі 370С, так як імунна реакція з антигеном вимагає оптимальної температури. Як правило, аглютинація настає протягом 3-5 хв. Після закінчення цього часу для виключення неспецифічної агрегації еритроцитів в пробірку додають 2-3 мл ізотонічного розчину хлориду натрію і перемішують (але збовтуючи!), 2-3 рази перевертаючи пробірку.
У деяких випадках не представляється можливим визначення резус-приналежності реципієнта, тоді користуються індивідуальної пробою на резус-сумісність крові донора і реципієнта.
На чашку Петрі наносять 2 краплі сироватки крові хворого і маленьку краплю переливається крові, їх змішують і ставлять на водяну баню (42-45 ° С) на 10 хв. Якщо наступила аглютинація, то кров донора несумісна з кров'ю реципієнта і її переливати не можна.
Трактування результатів. Пробірки переглядають на світло неозброєним оком. При позитивному резуль-таті аглютинація виражається в появі пластівців з склеєних еритроцитів на тлі освітленої рідини. При негативному результаті рідина в пробірці залишається рівномірно забарвленою, без ознак агглю-тінаціі еритроцитів. Результат враховують як істинний після перевірки контрольних, зразків, т. Е. При поло-тивних результаті зі стандартними резус-негативними еритроцитами, одногруппной з досліджуваної кров'ю.
ВИЗНАЧЕННЯ резус ПРИЛАДДЯ КРОВІ ЗА ДОПОМОГОЮ Цоліклони
Цоліклони виготовляються з асцитної рідини мишей - носіїв анти-D і анти-С гібридом. Цоліклони Анти-D, Анти-С, Анти-с призначені для визначення резус приналежності крові.
Хід визначення. На планшет індивідуальними піпетками наносяться Цоліклони Анти-D, Анти-С, Анти-с по одній великій краплі (0,1 мл). Поруч з краплями антитіл наноситься по одній маленькій краплі досліджуваної крові (0,01 мл). Кров змішується з реагентом. Спостерігається хід реакції з Цоліклони візуально при легкому погойдуванні планшета протягом трьох хвилин. Аглютинація еритроцитів з Цоліклони зазвичай настає в перші 3-5 сек. але спостереження слід вести 3 хвилини через більш пізнього появи аглютинації з еритроцитами, що містять слабкі різновиди резус-антигену. При використанні Цоліклони термостатіровать не потрібно,
Інтерпретація результатів. Результат реакції в кожній краплі може бути позитивним або негативним. Позитивний результат виражається в аглютинації (склеюванні) еритроцитів. Агглютінати видно неозброєним оком у вигляді дрібних червоних агрегатів, швидко зливаються в великі пластівці. При негативній реакції крапля залишається рівномірно забарвленою в червоний колір, агглютінати в ній не виявляються.
Наявність аглютинації з Анти-D, Анти-С або Анти-с Цоліклони свідчить про те, що кров резус-позитивна, а відсутність аглютинації - що кров резус-негативна.