Пряма імунофлюоресценція (піф) - студопедія
Цей метод передбачає пряме виявлення антигенів хламідій. При люмінесцентної мікроскопії включення хламідій визначаються у вигляді зеленої або жовто-зеленої флуоресценції включень на коричнево-помаранчевому тлі цитоплазми клітин Включення можуть мати зернисту гомогенну або змішану структуру.
Показаннями для діагностики хламідійної інфекції цим методом є:
1.Острий фаза захворювання.
2.Хроніческая фаза захворювання
3 Встановлення етіології хронічного інфекційного процесу урогенітального тракту
4. Вагітність з обтяженим акушерським анамнезом
5. Безпліддя неясного генезу.
Діагностична інформативність ПІФ пов'язана з тим, що з її допомогою виявляються не тільки корпускулярні, а й розчинні антигени хламідій Цей метод не залежить від можливої зміни тинкторіальних властивостей мікроорганізму в процесі захворювання і лікування. ПІФ-метод є найважливішим скринінгове методом діагностики урогенітального хламідіозу. Його чутливість і специфічність при використанні моноклональних антитіл становить відповідно 65-90% і 85-90%. При оцінці результатів слід враховувати, що тільки показники внутрішньоклітинної флюоресценції можуть оцінюватися як позитивного результату цього тесту при використанні поліклональних антихламідійний антитіл, при використанні моноклональних - результат вважають за наявності 10 ЕТ в полі зору. Соскобние препарати готують також, як і для Цітоскопіческій досліджень.
Випускають діагностичні набори, що містять моноклональні антитіла для ПІФ, наступні фірми: Syva, Drfco, Kallastad, Bartrels, Boots celltech, California Integrated Diagnostics, Orion Diagnostica. Реагенти фірм Syva, Difco, Kallastad представляють собою мічені Фітц моноклональні антитіла до основного білка зовнішньої мембрани хламідій, а реагенти інших фірм - моноклональні антитіла до родоспеціфіческому хламидийному ліполісахаріду (ЛПС). ВУкаіни ЗАТ "Ниармедик плюс" при НІІЕМ ім. Н.Ф. Гамалії РАМН випускає моноклональні антитіла до ЛПС хламідій, які успішно конкурують з продукцією іноземних фірм за якістю продукції. Це набір "Хламоноскрін" для визначення моноклональних антитіл до родоспеціфіческому ліпополісахарідние антигену і набір "Хламоноскрін-2" для визначення моноклональних антитіл до видоспецифічні білкового антигену хламідій трахоматис. Набори мають ФС $ 2-359598 і реєстраційне посвідчення МінздраваУкаіни 93/270/9.
Моноклонайьние антитіла відрізняються один від одного по визиваемЮй яскравості світіння, постійності виявляються форм ЕТ і ступеня специфічності. Для діагностики хламідії цим методом необхідний люмінесцентний мікроскоп.
В цілому, метод ПІФ відповідає критеріям високої чутливості і специфічності, але вимагає виконання досвідченим, компетентним лабораторним працівником.
Висококваліфікована експертна оцінка методом ПІФ рідко буває доступною, тому середня чутливість його знижується. Метод недостатньо чутливий і для стабільного визначення малих кількостей ЕТ. До того ж неможливо перевірити і негативні результати, і, отже, виявити серед них хибнонегативні, що призводить до зниження чутливості.