Лабораторна діагностика чуми 1
Чума є особливо небезпечною інфекцією., Тому виділення і
вивчення збудників чуми проводять тільки * спеціальних протичумних учрежденіях- протичумних станціях, спеціальних ла-бораторіях, науково-дослідних інститутах - при строгому дотриманні особливого режиму. З діагностичною метою проводять бак-теріоскопіческій, бактеріологічний, біологічний і серологію-ний методи дослідження, а також експрес-діагностику.
Досліджувані матеріали. Залежно від клінічної фор-ми чуми від хворого беруть; пунктат з бубону, виділення шкірної виразки, кров, мокротиння, сечу, випорожнення. Чи підлягає дослідженню секційний матеріал: лімфатичні вузли, кров, внутрішні орга-ни. Досліджують також хворих тварин і їх трупи, бліх, харчові продукти, воду, повітря і інші об'єкти зовнішнього середовища. Матеріал беруть, дотримуючись особливі правила обережності, працюють в про-тівочумном костюмі. Взятий матеріал поміщають в банки з притер-тій пробкою, які укладають в герметичний контейнер і доставляють в лабораторію спеціальним транспортом.
Бактериоскопическое ісследованіе.Із взятого матеріалу го-товят мазки і фіксують їх в суміші Нікіфорова Мазки забарвлюють по Граму і м'зтіленовим синім по Леффлеру (для виявлення біпо-лярной забарвлення). При виявленні в мазках грамнегативних крейда-ких бактерій овоидной форми, забарвлених біполярно, видають попередній позитивний результат.
Можна застосувати пряму РІФ, обробивши мазки протівочум-ної люминесцирующей сироваткою (експрес-метод).
Бактеріологічне ісследованіе.Ісследуемий матеріал за-сівби невідповідні поживні середовища: кров (5-10 мл) в кол-бу з бульйоном Хоттингера або МПБ, об'ємом 100 мл, інші матеріали на чашки з агаром Хоттингера. Для стимуляції росту в живильний агар додають кров кролика або коні - цільну (0,1-0,2%) або гемолізовані (1-2%) і сульфіт натрію, який крім стимулюючого ефекту, пригнічує ріст сторонньої мікро-флори. Як інгібітор сторонніх бактерій додають так-же і генціанвіолет (в концентрації 1: 50000). Посіви витримують в термостаті при 25-28 ° С. Уже через 10-12 годин на чашках Петрі з'являються мікроколонії. нагадують осколки битого скла; до 24 години з них формуються R-колонії у вигляді «мереживних платоч: ков» з піднесеним горбистим центром; після 48 годин колонії гру-беют, центральна частина колонії набуває коричневого кольору.
У бульйоні утворюється пухка плівка, від якої опускаються нитки, на дні накопичується осад.
Виділену чисту культуру ідентифікують за морфологічес-ким, культуральними, біохімічними і серологічним властивостям. по чутливості до чумних бактеріофагу і патогенності для живіт-них. Проводячи ідентифікацію, слід в першу чергу диференціювання ровать збудника - Ypestis -01- Yersinia pseudotuberculosis. Ypestis біохімічно активна, ферментує з образозаніем кислоти ряд вуглеводів, відновлює нітрати в нітрити, не раз-жижа желатину, не утворює індол.
Серологічну ідентифікацію проводять діагностичними сироватками. Найбільш специфічна РИГА (ронг) з ерітроцітар »ним антітельньш діагностикумів, навантаженим моноклональними антікапсул ьнимі (Ft) антитілами. Біологічне дослідження проводять одночасно з други-ми методами. Досліджуваним матеріалом заражають морських свинок або мишей внутрибрюшинно, підшкірно або накожно в поголений і ска-ріфіцірованний ділянку шкіри морських свинок - ( «австрійський ме-тод»). Цей метод застосовують, якщо матеріал забруднений сторонньої мікрофлорою.
Морські свинки гинуть через 3-4 дні при всередині очеревинної зараженні і через 5-7 днів - при нашкірному. З крові і внутрішніх органів роблять мазки-відбитки для мікроскопічного досліджень-ня і виділяють чисту культуру, яку ідентифікують. При розтині враховують патологічні зміни: запалення лімфа-тичних вузлів, геморрагически-некротичні вогнища в селезінці та інших органах, ексудати в порожнину. У мазках-відбитках з орга-нів виявляють велику кількість грамнегативних біполярно забарвлених паличок.
Серологічний метод. Для виявлення антигенів использу-ють РИФ, РНАТ, ІФА і РП.
Антитілі в сироватці крові виявляють в реакціях РИГА і ІФА для встановлення ретроспективного діагнозу, а також при обследова-ванні гризунів в природних осередках чуми.
Важливе значення має експрес-діагностика чуми, дозволяю щая в більш ранні терміни розпочати лікування хворих і проводити мероп-ріятія по боротьбі з цією особливо небезпечною інфекцією. До прискореним методам діагностики відносять РИФ, ІФА, фагодіагностіку і метод швидкого зростання Y.pestis на збагачених і елективних середовищах.
Специфічна профілактика і лікування чуми
Специфічна профілактика здійснюється за епідеміолого-гическим показаннями - епізоотія чуми серед гризунів, виявлення хворих на чуму домашніх тварин, можливість завезення інфекції хворою людиною, а також вибірково особливо загрозливих Контіні-Гент - співробітникам протичумних установ та особам, які мають постійний або тимчасовий зв'язок з територіями, де спостерігаються епізоотії (тваринники, агрономи, мисливці, заготівельники, археологічних-логи, геологи і т.д.).
Застосовується чумна жива вакцина, що представляє собою жи-ші бактерії вакцинного штаму чумного мікроба EV лінії НДІ-ЕГ, лиофильно висушені. Вакцинацію проводять одноразово внутрікожньш, підшкірним, нашкірному або інгаляційним способу-ми. Ревакцинацію проводять через один рік, а при несприятливій епідеміологічній обстановці - через 6 місяців
Лікування. Хворі чумою підлягають суворої ізоляції і обязатель-ної госпіталізації. Етіотропне лікування залежить від форми захворювання. Препарату-ми вибору є антибіотики левоміцетин, стрептоміцин, тетра-циклін, аміноглікозиди та інші.
Bacillus anthracis - збудник сибірської виразки
Сибірська язва- гостра зоонозних інфекція, що протікає з важкою інтоксикацією, серозно-геморагічним запаленням шкіри і лімфовузлів, залученням внутрішніх органів, розвитком сепсису. Переважає шкірна форма сибірської виразки, значно рідше зустрів чаются легенева і кишкова форми.
Збудник - B.anthracis- відноситься до сімейства ВасШасеае, роду Bacillus. Це великі нерухомі грампозитивні татка розмірами 6-10x1-2мкм, розташовані ланцюжками В організмі об-роззують поліпептидні капсули, у зовнішньому середовищі - центрально распо-лежання суперечки, що не перевищують діаметра вегетативної клітини.
В.anthracis добре росте на звичайних поживних середовищах - МПБ, МПА та інших в аеробних умовах. На рідкому середовищі спостерігається при-донний зростання у вигляді «клаптика вати», середовище залишається прозорою. На чаш-ках з МПА через добу утворюються R-колонії 3-5 мм в діаметрі, плоскі, сріблясто-сірого цвега з зернистою поверхнею і торочкуватими кра-ями, що складаються з переплетених ланцюжків бактерій (колонії Порівнюючи-ють з «левової гривою» або «головою медузи»), Сібіреязвенние палички мають виражену біохімічної активністю,
Антигени. В. anthracis КМТ грушоспеціфічестй полісахарг1?> - ниі термоетабільний антиген, пов'язаний з клітинною стінкою і ві-доспеціфіческгш капсул'ний термопабіяьний антиген. Антигенну активність має також протективний антиген і утворений за його участю летальний і набряклий токсини.
Вегетативні форми В.anthracis не володіють значною різі-стентності у зовнішньому середовищі, спори збудника сибірської виразки, навпаки, виключно стійкі. У воді суперечки В.anthracis вижи-ють близько 10 років; в грунті
багато десятиліть; при кип'ятінні -Зберігає життєздатність від 10 хвилин до 1 години, під дією дезінфікуючих - речовин гинуть через 1-2 години і пізніше. Вироблення шкіри і хутра, обробка вовни, сушка та засолювання м'яса не знищують сибіркових суперечка.