Іммунодіагностіка порушень фагоцитозу
Фагоцитоз - комплекс клітинних реакцій, спрямованих на розпізнавання, поглинання і елімінацію з організму корпускулярних частинок розміром більше 0,5 мкм. Процес фагоцитозу складається з наступних стадій: хемотаксис, адгезія, поглинання, киллинг і переварювання об'єкта.
Поглинювальна активність (фагоцитарне число - ФЧ). Метод дослідження: мікроскопічний. Виявляє відсоток нейтрофілів, здатних поглинати корпускулярні антигени (дріжджі, латекс, культура стафілокока). Поглинювальна активність порушується рідше, ніж інші функції фагоцитуючих клітин. Норма (об'єкт фагоцитозу - дріжджі): 60-90%.
Поглинювальна активність знижена - мієлопроліферативні захворювання, важкі інфекції, сепсис, перитоніт /
Стадія перетравлення (завершеність фагоцитозу)
Методи дослідження. мікроскопічний, проточна цитометрії. Мікроскопічний метод заснований на підрахунку кількості живих і мертвих мікробних клітин в 100 нейтрофилах і обчисленні індексу бактерицидності (ФМ = чубитися / Чжівих). Метод проточної цитометрії включає автоматизовану реєстрацію кількості живих і мертвих мікробних клітин до і після їх взаємодії з нейтрофілами. Норма (мікроскопічний метод): 60-70%.
Переваривающая активність знижена - рецидивні бактеріальні інфекції; уповільнені гнійно-запальні процеси; довго не загоюються рани; мієлолейкози, цукровий діабет, уремія, опіки, порожнинні опера-ції, імуносупресивної терапії.
Бактерицидна активність (киллинг)
Антимікробні фактори нейтрофілів діляться на киснево і кисло-роднезавісімие. Методи дослідження киснево факторів. НСТ-тест, хемілюмінесценція.
НСТ-тест спонтанний (тест відновлення нітросинім тетрозолія) заснований на здатності частинок нітросинім тетразолия, поглинених нейтрофілом, змінювати забарвлення під дією активних форм кисню. Тест виявляє відсоток нейтрофілів з активними формами кисню. Метод дослідження. мікроскопічний. Норма. 4-10%.
НСТ-тест підвищений - гострі бактеріальні інфекції (в початковому періоді), генералізація вогнищевих запальних процесів, туберкульоз легенів, хронічні гепатити, ревматизм, ревматоїдний артрит.
НСТ-тест знижений - хронізації запального процесу, злоякісні новоутворення, тяжкі опіки, травми, стрес, недостатність харчування, лікування цитостатиками і імунодепресантами.
НСТ-тест негативний - вроджений дефект фагоцитозу (хронічна гранулематозная хвороба).
НСТ-тест стимульований (фагоцитарний резерв) відображає потенційну здатність нейтрофілів продукувати активні форми кисню у відповідь на антигенну роздратування. Норма (фагоцитарний резерв) 2,4-3,5.
Фагоцитарний резерв знижений - гнійно-запальні процеси, важкі піогенні інфекції шкіри; мієлолейкоз, цукровий діабет, уремія, опіки, порожнинні операції, імуносупресивної терапії.
Іммунодіагностіка порушень клітинної ланки імунітету
Тести I рівня. фенотипування лімфоцитів
Згідно з рекомендаціями ВООЗ оцінка популяційного складу лімфоцитів має діагностичне значення при первинних і вторинних імунодефіцитах, лімфопроліферативних захворюваннях та ВІЛ-інфекції.
Під світловим мікроскопом все лімфоцити виглядають однаково, проте їх можна відрізнити за антигенами клітинної поверхні, їх позначають CD-молекулами (СD1, СD2, СDЗ і т.д. до СD130) і виявляють за допомогою моноклональних антитіл. Набір антигенів залежить від типу клітин та їх функцій. Відповідно до загальноприйнятої у світі СD-кластерної класифікацією маркером всіх Т-лімфоцитів вважають CD3, маркером Т-хелперів CD4, маркером Т-кілерів / цитотоксичних CD8 і т.д.
Метод дослідження: проточна цитофлуориметрії з використанням мічених флуорохромних барвниками моноклональних антитіл до специфічних поверхневим маркерами цих клітин і подальшої автоматичної реєстрацією.
Чисельність основних субпопуляцій лімфоцитів крові (нормальні значення)
Рівень CD3 + підвищений - початковий період гострого запального процесу, лімфолейкоз, загострення хронічного запального процесу.
Рівень CD3 + знижений - первинні і вторинні імунодефіцити з порушен-ням Т-клітинної ланки імунітету; запальні захворювання, злоякісні новоутворення, стан після травми, операції, прийом цитостатиків, гормонів, імунодепресантів.
Активовані Т-лімфоцити (СD25, НLA-DR)
Активаційні маркери - CD25, НLA-DR. з'являються на Т-лімфоцитах, що знаходяться в стадії активації і можуть бути використані для діагностики, оцінки активності иммунопатологических захворювань, моніторингу лікування.
Рівень CD3 + CD25 +. CD3 + НLA-DR + підвищений - активація імунної відповіді: гострий або хронічний запальний процес, пневмонія, ВІЛ-інфекція, аутоімунні та онкологічні захворювання. Показники знижуються до норми за сприятливого перебігу захворювання.
Рівень CD3 + CD25 +. CD3 + НLA-DR + знижений - імунодефіцити з порушенням Т-клітинної ланки імунітету.
Рівень CD3 + CD4 + підвищений - гострий інфекційно-запальний процес, загострення алергічних і аутоімунних захворювань.
Рівень CD3 + CD4 + знижений - вроджені та набуті імунодефіцити, ВІЛ-інфекція, інфекційний мононуклеоз, злоякісні новоутворення, тривале лікування цитостатиками, гормонами, імунодепресантами.
Т-цитотоксичні (Т-кілери) (CD3CD8)
Рівень CD3 + CD8 + підвищений - інфекції, викликані внутрішньоклітинними паразитами (віруси, бактерії, гриби, найпростіші).
Рівень CD3 + CD8 + знижений - первинні і вторинні імунодефіцити, прогресуючі злоякісні новоутворення, променева терапія, тривале лікування цитостатиками, гомонами, імунодепресантами.
При деяких захворюваннях діагностичне і прогностичне значення має співвідношення CD4 / CD8 або імунологічний індекс (ІРІ). Норма. 1,2-2,5.
CD4 / CD8 (ІРІ) підвищено - аутоімунні захворювання, гострий Т-лімфобластний лейкоз, тимома.
CD4 / CD8 (ІРІ) знижений - вірусні інфекції (герпес, кір вірусний гепатит, інфекційний мононуклеоз, ВІЛ / СНІД), хронічні захворювання, пухлини, множинна мієлома. Величина ІРІ менше 1 побічно відповідає імунодефіциту.
Натуральні кілери (НK-клітини, CD16CD56)
НK-клітини - великі гранулярні лімфоцити, лизирующие клітини - мішені, інфіковані вірусами, внутрішньоклітинними збудниками, а також мутантні і пухлинні клітини, без специфічного розпізнавання, необхідного для Т-кілерів.
Рівень НK-клітин (CD3 + - CD16 + CD56 +) підвищено - гострий запальний процес, бронхіальна астма, злоякісні новоутворення, лейкоз.
Рівень НK-клітин (CD3 - CD16 + CD56 +) знижений - вроджені імунодефіцити, паразитарні інфекції, аутоімунні захворювання, пухлини, стрес, прийом цитостатиків і кортікосероідов.
НKТ-клітини мають рецептори, як НK-клітин, так і Т-лімфоцитів. Здійснюють регуляторну функцію, синтезуючи цитокіни.
Рівень (CD3 + CD16 + CD56 +) підвищено - при гострих важких запальних процесах, онкологічних захворюваннях.
Рівень (CD3 + CD16 + CD56 +) знижений - при аутоімунних захворюваннях.
Рівень СD19 +, CD20 + підвищений - бактеріальні та паразитарні інфекції, ВІЛ-інфекція; хронічний В-лімфолейкоз, аутоімунні захворювання (ВКВ, ревматоїдний артрит); бронхіальна астма.
Рівень СD19 +, CD20 + знижений - гіпо- та агаммаглобулінемії (вроджені та набуті); лімфолейкози, лімфоми не в-клітинного типу; спленектомія; прийом імунодепресантів.