Лабораторна діагностика чуми
Лабораторна діагностика чуми
Бактеріологічні дослідження мають виняткове значення при лабораторній діагностиці чуми. Матеріалом для дослідження служать пунктат з бубонів і карбункулів, відокремлюване виразок, харкотиння і кров хворих. Дослідження починається з приготування мазків для бактеріоскопії.
Мазки фарбуються за Грамом. метиленової синькою Леффлера або за Романовським. Посів проводиться на звичайні поживні середовища. На МПА зростання чумних мікробів може бути виявлений через 15 18 годин, в м'ясо-пептонном бульйоні - через 1-2 доби. Якщо на молоду колонію чумного мікроба нанести краплю чумного бактеріофага, то через кілька годин інкубації колонія стає прозорою (феномен Творта).
При зараженні білих мишей або морських свинок матеріалом від хворих тварин гинуть протягом 3-9 діб, а в мазках-відбитках з органів загиблих тварин виявляється велика кількість чумних паличок.
Антитілоутворення в результаті чумної інфекції або вакцинації носить недостатньо виражений характер, в зв'язку з чим імунологічні методи виявлення антитіл застосовуються обмежено, в основному для ретроспективного діагнозу.
Зокрема, запропоновані реакції зв'язування комплементу та непрямої гемаглютинації, що виявляють антитіла до I фракції і токсину палички чуми. У перехворілих рівень антитіл до I фракції порівняно високий, антитоксинів ж на низькому рівні. У щеплених живою протичумної вакциною антитіла до I фракції виявляються з непостійністю і на низькому рівні.
Реакція непрямої гемаглютинації для виявлення протичумних антитіл застосовується в основному при епізоотологічне обстеження гризунів. Форман-нізірованних еритроцити барана сенсибилизируют кап-Сульна антигеном чумного мікроба - фракція IA.
Позитивний результат (при хороших контролях зі стандартною протичумної сироваткою в розведенні 1: 100 000 і вище) вважається починаючи з розведення досліджуваної сироватки 1:40.
Для ідентифікації збудника чуми на об'єктах середовища і диференціації його від мікробів псевдотуберкульозу гризунів застосовується імунофлуоресцентний метод. Мазки обробляють трьома люмінесцентними сироватками - полівалентним (капсульно-соматичним) протичумним, чумних капсульної і псевдотуберкулезних імуноглобулінами.
Застосування зазначених трьох люминесцирующих сироваток дає можливість виявити і надійно диференціювати капсульні і бескапсульних варіанти збудника чуми від збудника псевдотуберкульозу гризунів. Час дослідження - 2 години.
Розроблено і випробувані в епідеміологічному досвіді алергени - Пістинь і песталлерген ГКІ, які, однак, не знайшли ще виходу в широку практику. Для ідентифікації антигену чумного мікроба в органах тварин, а також для ідентифікації виділених культур збудника застосовується реакція преципітації в агарі.
Як джерело преципітинів застосовується протичумна сироватка або її евглобуліновая фракція. Облік реакції при використанні цільної сироватки - через 18 годин, при використанні евглобуліновой фракції - через 6-8 годин.