Культивування гамет і ембріонів в еко
Після запліднення яйцеклітини потребують підрощування в спеціальних середовищах. За ними спостерігають протягом декількох днів, а потім вибирають більш якісні для підсадки.
Що таке культивування в ЕКО?
Культивування гамет і ембріонів - це спосіб підтримки розвитку майбутнього ембріона поза організмом. Через 18 годин після з'єднання статевих клітин визначають, чи відбулося запліднення. Якщо результат позитивний, яйцеклітини переносять на спеціальну середу, яка імітує рідина в просвіті маткових труб.
Тривалість культивування може бути різною:
- «Базова» тривалість становить 3-4 дні;
- тривалий культивування - 5-6 днів.
Вибір терміну культивування залежить від різних чинників:
- оснащеність клініки;
- наявність спеціальних середовищ для пролонгованої культивування;
- кількість отриманих зигот;
- стан організму матері.
Якщо від жінки було отримано мало яйцеклітин, а запліднити 1-2, то використовують перенесення на 3 день.
Жінкам до 36 років з 1 або 2 спробою ЕКО рекомендують виконувати підсадку однієї бластоцисти на 5 день. Вважається, що зародок до 5 діб більш життєздатний, а стан ендометрію оптимально для імплантації.
Середовища для культивування ембріонів
До пересадки ембріона в матку його ростять в спеціальних умовах в інкубаторі. Кожен етап ЕКО протікає в своєму середовищі, яка підібрана з урахуванням фізіології жіночого організму. Вони намагаються повторити процеси, що відбуваються в маткових трубах у міру просування по ним яйцеклітини. Середовища для культивування ембріона відрізняються за своїми характеристиками:
- Середовища для послідовного культивування до 3 дня. Склад доведено підвищує частоту дроблення, має оптимальний рівень рН 7.2, що сприяє поліпшенню показників розвитку зародка. Як результат - більша кількість підходить для підсадки. Складаються такі середовища з замінних амінокислот, альбуміну, вітамінів, лактату кальцію, практично не містять глюкозу.
- Середовища для культивування до 5 дня містить амінокислоти, велика кількість глюкози, фосфат, таурин і вітаміни. Концентрація речовин враховує фізіологічні потреби бластоцисти.
- Єдині середовища підходять для всіх етапів ЕКО - від запліднення до культивування та підсаджування ембріона. Імовірність імплантації збільшує додавання гіалуронової кислоти.
Етапи розвитку ембріона
У заплідненої яйцеклітини щодня відбуваються зміни.
На 1 день оцінюється, чи відбулося запліднення. Яйцеклітина вважається заплідненої, якщо в ній помітні 2 пронуклеуса - генетичний матеріал батьків. На цьому етапі відбраковують невідповідний матеріал:
- Якщо мало місце запліднення двома або трьома сперматозоїдами;
- Незрілі яйцеклітини, в яких не відбулося запліднення.
Перенесення в цей період не виконують з двох причин:
- Яйцеклітина повинна знаходитися в матковій трубі, а не в матці.
- Немає критеріїв для визначення життєздатною якісної яйцеклітини.
На 2 день відбувається дроблення яйцеклітини з утворенням двох бластомерів. Фахівці оцінюють форми бластомерів, кількості без'ядерних частин. Чим їх більше, тим нижче потенціал клітини на подальший розвиток. Пересадку в цей день виконують тільки при отриманні 1-2 яйцеклітин.
На 3 день утворюється вже до 8 бластомерів. Якщо є якісь аномалії, то розвиток ембріона припиняється саме. В цей день вже можливе виконання підсадки, але критерії оцінки ненадійні у визначенні життєздатності.
На 4 день 16 бластомерів утворюють Морула, в якій поступово утворюється порожнина. У фізіологічних умовах вона потрапляє в матку. Пересадка в цей день дає хороші результати по приживлюваності ембріона.
На 5-6 день порожнину всередині морули збільшується до половини її обсягу, вона переходить в стадію бластоцисти. Клітини всередині неї розташовуються шарами, які дадуть початок тілу зародка і оболонок з плацентою. Бластоциста звільняється від блискучої оболонки, яка покривала її зовні. З цього моменту вона здатна прикріплятися до стінки матки.
Перенесення ембріона на 5-6 день збільшує кількість прижилися зародків і успішних вагітностей. За статистикою приживається кожен другий зародок. Це дає можливість підсаджувати менше число бластоцист, що знижує ймовірність багатоплідних вагітностей.
Протоколи культивування в ЕКО
- кількість бластомерів по днях, день запліднення вважають нульовим;
- відсоток фрагментації позначають буквами;
- розмір бластоцисти визначають за обсягом порожнини, привласнюють номер від 1 до 6;
- дві літери позначають якість клітинної маси бластоцисти, перша - внутрішнього шару, друга - трофобласта;
Якість клітин визначається класом, де 1 (А) - відмінно, а останній 4 (D) - незадовільно. Ембріони 4 класу не використовуються для підсадки і кріоконсервування.
Коли культивування неможливо?
Для культивування ембріонів протипоказань немає, але при наявності наступних чинників не рекомендується вдаватися до ЕКЗ без попереднього лікування:
- міома;
- злоякісні пухлини;
- запальні або інфекційні процеси;
- загострення хронічних захворювань;
- відсутність матки.
Метод підрощування ембріонів підвищує відсоток настання вагітностей. При виборі терміну культивування лікар повинен відштовхуватися від стану конкретної пацієнтки.
Юлія Шевченко, акушер-гінеколог, спеціально для Mirmam.pro