біологічний метод
Застосовується для діагностики сальмонельозів. Сальмонели харчових токсикоінфекцій на відміну від сальмонел паратифу В патогенні для білих мишей. Ця ознака використовується для їх диференціації. У перший день дослідження поряд з посівом патологічного матеріалу і харчових продуктів проводиться пероральне зараження білих мишей, у яких розвивається септицемія і вони гинуть через 1-2 діб. При розтині виявляють різко збільшену селезінку, іноді і печінку, а посів крові з серця і матеріалу з внутрішніх органів дозволяє виділити культури сальмонел.
Прискорені методи діагностики
Тривалість класичного бактеріального дослідження (4-5 днів) не завжди відповідає потребам клініки та епідеміології. Особливо це відноситься до дизентерії з її коротким і бурхливою течією.
Існують два напрямки: 1) прискорення класичного методу за допомогою використання найбільш раціональних поживних середовищ, скорочення інтервалів між пересіву і т.д .; 2) застосування методів, заснованих на знаннях антигенної структури грамнегативних мікробів, на виявлення специфічного антитіла або його фракції - полісахариду.
Для експрес-діагностики дизентерії застосовується люмінесцентна мікроскопія. Мазок з випорожнень або колоній обробляють специфічної люминесцирующей сироваткою і проводять мікроскопію в люмінесцентному мікроскопі.
Лабораторна діагностика холери
Основним в лабораторній діагностиці холери є бактеріологічний метод.
З патологічного матеріалу (випорожнення, блювотні маси) готують мазки, фіксують спиртом або сумішшю Нікіфорова, фарбують за Грамом і проводять мікроскопію. Надалі при лабораторному підтвердженні холери хоча б в одному випадку мазки забарвлюють тільки фуксином Пфейффера.
Внаслідок великого поліморфізму поряд з типовими клітинами в мазку можна виявити кокковидной, паличкоподібні і спіралеподібні форми, що зменшує цінність цього методу.
З патологічного матеріалу готують препарат "висяча крапля" для виявлення рухомого вібріона (фазово-контрастна мікроскопія).
Виявлення в мазках великої кількості вигнутих грамнегативних паличок і рухливих вібріонів в "висячої краплі" дає можливість дати попередній позитивну відповідь.
Одночасно з бактеріоскопії досліджуваний матеріал засівають на рідкі та щільні живильні середовища. Як рідких середовищ збагачення рекомендується 1% лужна пептонна вода, 1% пептонна вода з телуриту калію, рідке середовище Монсурі і ін. В якості щільних поживних середовищ використовують лужний МПА і одну з селективних поживних середовищ: середу Аронсона, середу Монсурі, ТСВS і ін . Посіви інкубують при температурі 37 ° С.
Через 5-6 годин з плівки або поверхні середовища роблять мазок, фарбують за Грамом, визначають рухливість в препараті "висяча крапля". Проводять орієнтовну реакцію аглютинації на склі з О-холерної сироваткою (0-1), розведеної 1: 100, або реакцію іммобілізації холерного вібріона О-холерної сироваткою, результат якої враховують при фазово-контрастної мікроскопії. Обмеження рухливості вібріонів і освіту агглютіната настає протягом 1-2 хвилин.
На підставі отриманих даних видають другий попередній результат, в якому зазначають рухливість вібріона і його ставлення до агглютинируют сироватці.
Матеріал з плівки пересівають в чашки з лужним агаром або селективної середовищем і одночасно роблять пересів вдруге на 1% пептони воду, зміни в якій вивчають через 5-6 годин.
Через 10-15 годин після посіву вивчають зростання на другий середовищі накопичення (пептонній воді), характер колоній на чашках, з колоній готують мазки, фарбують, визначають рухливість. Проводять орієнтовну реакцію аглютинації на склі з холерним вібріоном, яке виросло на чашках
з щільним середовищем, з О-холерної сироваткою, розведеною 1: 100 і орієнтовну реакцію аглютинації з типовими сироватками Інаба і Огава в розведенні 1:60 для визначення серовара.
При позитивній реакції і наявності характерних для холерного вібріона ознак видають третій попередній результат дослідження.
Матеріал з колоній, що дали позитивну реакцію аглютинації висівають на: поліуглеводную середу (містить 2-3% цукру), бульйон, на лактозо-сахарозний середу Ресселя.
З молодої 3-4 годину. бульонной культурою проводять розгорнуту реакцію аглютинації.