Еритроцити, ветеринарні технології
Еритроцити (від грец. Ἐρυθρός - червоний і κύτος - вмістилище, клітина), також відомі під назвою червоні кров'яні тільця.
Формування еритроцитів (еритропоез) відбувається в кістковому мозку черепа, ребер і хребта, а у дітей - ще й в кістковому мозку в закінченнях довгих кісток рук і ніг. Тривалість життя - 3-4 місяці, руйнування (гемоліз) відбувається в печінці і селезінці. Перш ніж вийти в кров, еритроцити послідовно проходять кілька стадій проліферації і диференціювання в складі ерітрона - червоного паростка кровотворення.
а) З стовбурових гемопоетичних клітин спочатку з'являється велика клітка з ядром, що не володіє характерним червоним кольором - Мегалобластов
б) Потім вона забарвлюється в червоний колір - тепер це еритробласт
в) зменшується в розмірі в процесі розвитку - тепер це нормоцит
г) втрачає ядро - тепер це Ретикулоцит. У птахів, плазунів, земноводних і риб ядро просто втрачає активність, але зберігає здатність реактивації. Одночасно зі зникненням ядра в міру дорослішання еритроцита з його цитоплазми зникають рибосоми та інші компоненти, які беруть участь в синтезі білка.
Ретикулоцити потрапляють в кровоносну систему і через кілька годин стають повноцінними еритроцитами.
На початок
Основні функції еритроцитів:
Дихальна - Функція виконується еритроцитами за рахунок пігменту гемоглобіну, який має здатність приєднувати до себе і віддавати кисень і вуглекислий газ.
Поживна - Функція еритроцитів полягає в транспортуванні амінокислот до клітин організму від органів травлення
Захисна - Визначається функцією еритроцитів зв'язувати токсини за рахунок наявності на їх поверхні спеціальних речовин білкової природи -антитіла.
Ферментативна - Пов'язано з тим що еритроцити є носіями різноманітних ферментів.
кількість еритроцитів
В 1 літрі крові у людини міститься еритроцитів:
1) У чоловіків 4,5 * 10¹² / л-5,5 * 10¹² / л (4,5-5,5 млн. В 1 мм ³ еритроцитів)
2) У жінок - 3,7 * 10¹² / л-4,7 * 10¹² / л (3,7-4,7 млн. В 1 мм ³)
3) У новонароджених - до 6,0 * 10¹² / л (до 6 млн. В 1 мм ³)
4) У літніх людей - 4,0 * 10¹² / л (менше 4 млн. В 1 мм ³).
У тварин у 1 л крові міститься:
Велика рогата худоба 5 - 7,5 * 10¹²
Коні 6,0 - 9,0 * 10¹² / л
Свині 6,0 - 7,5 * 10¹² / л
Вівці 7 - 12 * 10¹² / л
Кози 12-18 * 10¹² / л
Собаки 5? 2 - 8,4 * 10¹² / л
Кішки 6,6 - 9,4 * 10¹² / л
На початок
Підвищення кількості еритроцитів в крові
Збільшення числа еритроцитів в одиниці об'єму крові називається еритроцитоз. Взагалі збільшення вмісту еритроцитів в крові спостерігається досить рідко.
Фізіологічне підвищення еритроцитів в крові виникає у людей, які проживають в горах, при тривалих фізичних навантаженнях у спортсменів, при стресі, або при значному зневодненні організму.
Патологічне збільшення кількості еритроцитів в крові настає при:
* Збільшення утворення еритроцитів в червоному кістковому мозку (при хворобах крові, таких як еритремія); У хворих з еритремою зазвичай можна помітити яскраво-червоне забарвлення шкіри обличчя і шиї.
* Як результат підвищеного синтезу еритропоетину в нирках при недостатньому вмісті кисню в крові при захворюваннях дихальної та серцево-судинної систем (наприклад, у хворих з серцевою недостатністю або ХОЗЛ). У подібних випадках підвищення кількості еритроцитів у крові передує довга історія хвороби серця та легень.
На початок
Зниження кількості еритроцитів в крові
Зменшення числа еритроцитів в одиниці об'єму крові називається Еритропенія.
Основною причиною зниження кількості еритроцитів в крові є різні види анемії. Анемія (недокрів'я) може розвиватися в результаті порушення утворення еритроцитів в червоному кістковому мозку, в результаті їх підвищеного руйнування еритроцитів, наприклад при гемолітичних анеміях, а також при крововтратах.
Найчастіше спостерігається залізодефіцитна анемія, при якій недостатнє утворення еритроцитів виникає при дефіциті заліза через його недостатнє надходження в організм з їжею (вегетаріанська дієта), порушення всмоктування або збільшенні потреби організму в залозі (часто при вагітності, у дітей в періоди інтенсивного росту) . На тлі залізодефіцитної анемії спостерігається не тільки зменшення кількості еритроцитів в крові, але і можуть бути помічені інші симптоми цієї хвороби (Див Все про Анемії і її лікуванні).
Рідше зниження кількості еритроцитів в крові виникає при нестачі вітаміну В12 або фолієвої кислоти. У подібних випадках у хворих крім анемії спостерігаються порушення ходи і чутливості (поколювання і болі в руках і ногах).
Посилене руйнування еритроцитів, або гемоліз, як причина зниження кількості еритроцитів в крові зустрічається при спадкових захворюваннях в результаті порушення будови мембрани еритроцита (микросфероцитоз, овалоцитоз), гемоглобинопатиях (таласемія, серповидно-клітинна анемія); придбані причини гемолізу - хвороба Маркіафави-Мікеле, механічне пошкодження мембрани еритроцитів (штучний клапан серця, гігантські розміри селезінки у хворих на цироз), токсичне ушкодження мембрани еритроцитів (отруйні гриби, укус змії, солі важких металів).
Зменшення кількості еритроцитів також виникає при гострих масивних крововтратах (в результаті кровотеч при травмах, операціях, виразці шлунка), хронічні крововтрати призводять до залізодефіцитним анемія.
На початок
Методика розрахунку еритроцитів і лейкоцитів
Для підрахунку еритроцитів і лейкоцитів в лічильної камері в серологическую пробірку (з 4 мл ізотонічного розчину хлориду натрію) і в агглінаціонную пробірку (з 0,4 мл 3% розчину оцтової кислоти) різними капілярами від гемометра Салі вносять точно по 0, 02 мл крові, взятої з поглиблення в платівці або з ямочки скла (див. 3.1.1); вміст пробірок негайно змішують. У серологічної пробірці (для еритроцитів) отримують розведення в 200 разів, а в агглютінаціонние (для лейкоцитів) - в 20 разів.
Для підрахунку еритроцитів і лейкоцитів в автоматичному лічильнику кров в кількості 0, 02 мл (кров беруть в капіляр від гемометра) поміщають в 2 пробірки, в які попередньо наливають 4 мл стерильного ізотонічного розчину хлориду натрію. Отримують 1-е розведення (1: 200). У такому вигляді вміст пробірки може перебувати при кімнатній температурі протягом декількох годин, але пробірка повинна бути закрита пробкою. Безпосередньо перед тим як зробити підрахунок еритроцитів, готують 2-е розведення: в хімічний стакан місткістю 25 мл поміщають 20 мл ізотонічного розчину хлориду натрію і 0, 05 мл попередньо добре змішаного 1-го розведення крові, вміст склянки ретельно перемішують. для підрахунку лейкоцитів розведену кров гемолізує, додаючи до содержі- мому пробірки 0, 1 мл 2% розчину сапоніну, і ретельно перемішують. Гемолізовані кров виливають в хімічний стакан, в якому налито 12 мл ізотонічного розчину хлориду натрію, добре перемішують, переливаючи кілька разів рідина зі склянки в пробірку і назад. Через 2 хв приступають до підрахунку лейкоцитів.
В СРСР для підрахунку кількості еритроцитів і лейкоцитів використовують лічильну камеру Горяєва. Вона являє собою товсте прямокутне прозоре скло зазвичай з двома сітками, вигравіруваними на його поверхні. На бічних ділянках скла нанесені основні показники і назва лічильної камери. Сітки відокремлені один від одного, щоб уникнути затікання рідини поперечної канавкою. двома глибокими поздовжніми канавками сітки відокремлені від скляних прямокутних пластинок, до яких притирают шліфовані покривні скла; поверхню цих скляних прямокутних пластинок знаходиться на 0,1 мм вище ділянок камери, на яких нанесена сітка. Сітка камери Горяєва утворена системою розмежувальних ліній, проведених взаємно перпендикулярно. У ній є 3600 малих квадратів: сторона 1/20 мм, площа 1 / мм2, обсяг 1/4000 мкл; 225 великих квадратів: сторона 1/5 мм, площа 1/25 мм2, обсяг 1/250 мкл. Сторона всієї сітки З мм, площа 9 мм 2, обсяг 0, 9 мкл; висота камери, создаюIцаяся при притирання шліфованого покривного скла, - 0, 1 мм.
Сітку камери Горяєва вивчають при збільшенні (окуляр 1ОХ, об'єктив 8Х) з опущеним конденсором. Камеру встановлюють на предметний столик мікроскопа. Спостерігаючи в окуляр, відшукують сітку камери, чітко фокусують її зображення, встановлюють в поле зору верхній лівий кут сітки. Пересуваючи скло лівою рукою, послідовно вивчають окремі малі і великі квадрати, розглядають їх угруповання, при цьому повинна бути вивчена вся площа сітки.
Техніка заповнення камери Горяєва. Камеру перед заповненням миють водопровідною водою, насухо витирають, так само точно готують шліфоване покривне скло. Камеру Горяєва беруть в ліву руку. На ділянку камери, де нанесені сітки, укладають шліфоване покривне скло. Тепер скло беруть і правою рукою. При цьому нижня поверхня камери знаходиться на двох III пальцях, два II пальця притримують її спереду. Вільними двома 1 пальцями притирают шліфоване покривне скло, просуваючи його по поверхні прямокутних скляних пластинок плавно до появи кольорових кілець Ньютона в місцях зіткнення покривного скла з поверхнею прямокутних пластинок камери.
Заповнюють камеру Горяєва кров'ю, взятої пробіркових способом. для цього розведену кров в пробірці ретельно змішують і в рідину вносять скляну паличку з оплавленим кінцем або пастерівську піпетку. Краплю досліджуваної рідини завадять перед щілиною, що утворюється між шліфувальним склом і лічильної камерою, в результаті чого рідина заповнює простір над сіткою. Відповідно до описаної вище методикою одну з сіток заповнюють для підрахунку еритроцитів, другу - для підрахунку лейкоцитів. При заповненні камери стежать за тим, щоб в просторі над сіткою не було бульбашок повітря і надлишку рідини.
До підрахунку формених елементів в лічильної камері приступають через 2-З хв після її заповнення. Встановлюють камеру і знаходять сітку під мікроскопом так, як описано в 3.1.5.
Еритроцити підраховують в 5 великих квадратах, кожен з яких розділений на 16 малих квадратів. Підрахунок починають з лівого верхнього квадрата, а потім просувають камеру по діагоналі зверху вниз. Щоб уникнути повторного підрахунку одних і тих же еритроцитів керуються наступним правилом: підраховують всі еритроцити, що знаходяться всередині малого квадрата, і на розмежувальних лініях, коли вони більшою своєю половиною заходять усередину квадрата; клітини ж, пересічені розмежувальної лінією навпіл, підраховують лише на двох сторонах квадрата (на лівій і верхній); клітини, що виходять більшою своєю половиною за межі розмежувальних ліній, зовсім не вважають. Результати підрахунку еритроцитів по кожному з 5 великих квадратів записують окремо і підсумовують. для розрахунку кількості еритроцитів в 1 л користуються такою формулою:
х = (а * б * 400 / в) * 106
де х - кількість еритроцитів в 1 л крові; а - сума еритроцитів, підрахованих в 5 квадратах; 4000 - множник, що приводить результат до об'єму 1 мкл крові, оскільки обсяг малого квадрата 1/4000 мкл; б - розведення крові в 200 разів; в - число полічених малих квадратів - 80; 106 - кількість мкл в 1 л. для отримання більш точного результату рекомендують робити підрахунок в двох сітках і використовувати для підрахунку середній арифметичний результат
Лейкоцити підраховують в 100 великих квадратах. Ці квадрати згруповані по 4. Підрахунок починають з лівої верхньої угруповання, а потім просувають камеру послідовно від угруповання до угруповання (рис. 3.4, а). При підрахунку лейкоцитів у кожної угруповання з 4 квадратів дотримуються схеми, зазначеної на рис. 3.4, 6. При підрахунку лейкоцитів в кожному великому квадраті дотримуються тих же правил, які описані для еритроцитів. Підрахувавши кількість лейкоцитів у всіх 100 квадратах, записують результат, а потім роблять розрахунок за наведеною вище формулою, в якій лише цифра, яка характеризує розведення крові, дорівнює 20, а кількість підрахованих малих квадратів - 1600. Наприклад, при сумі підрахованих лейкоцитів 120 розрахунок кількості лейкоцитів в 1 л крові може виглядати так:
= (120 * 4000 * 20) / 1600 = 120 * 50 = 6000 млн = 6 * 10 ^ 9 / л
Для простоти розрахунку кількість підрахованих лейкоцитів множать на 50 або ділять на 2 і приписують два нуля. Для отримання більш точного результату рекомендують робити підрахунок в двох сітках і використовувати для розрахунку середній арифметичний результат
На початок
Визначення швидкості осідання еритроцитів (ШОЕ) Метод Панченкова.
Кров, змішана з розчином цитрату натрію, не згортається при стоянні, а розділяється на два шари: верхній - плазму, нижній - еритроцити; в залежності від змін хімічних фізичних властивостей досліджуваної крові осідання еритроцитів і поділ на шари відбувається з різною швидкістю.
При визначенні ШОЕ рекомендують дотримуватися наступних методичних вказівок: 1) брати кров натщесерце; 2) наносити більш глибокий укол в палець, щоб кров надходила в капіляр Панченкова без особливого натискання; 3) використовувати свіжоприготований ре- актив, чисті і сухі капіляри (для миття капілярів використовують хромовую суміш); 4) заповнювати капіляр суцільним стовпчиком крові без бульбашок повітря; 5) дотримуватися правильні співвідношення взятої крові і 5% розчину цитрату натрію (4 частини крові і 1 частина реактиву); б) ретельно змішувати взяту кров з реактивом; 7) встановлювати капіляри з кров'ю в апарат Панченкова в строго вертикальному положенні; 8) визначати ШОЕ при температурі 18-22 ос.
Хід визначення. Шляхом дво-, триразового насасиванія взятої крові з подальшим видуванням її в поглиблення пластинки кров змішують з реактивом. Цю маніпуляцію здійснюють за допомогою гумового балона. В цей же капіляр насасьхвают змішану з реактивом кров до мітки О (К), закривають верхній отвір капіляра II пальцем, витирають його звужений кінець від крові і проколюють їм листок паперу, в якому вказують прізвище обстежуваного і час обліку результатів дослідження. Апарат Панченкова (див. Рис. 3.1) підтримують лівою рукою, кінцем капіляра притискають одну з гумок приладу. Знявши II палець з верхнього отвору капіляра, його просувають до упору і відпускають, при цьому верхній кінець капіляра впирається в гумку. Завдяки такій герметизації кров не виливається. Через годину, з моменту встановлення капіляра з кров'ю в апарат Панченкова, виробляють облік ШОЕ. для цього вираховують, скільки поділок шкали займає шар плазми, що утворюється в результаті осі дання еритроцитів. Відповідь записують в міліметрах годину (мм / год). У нормі цифри ШОЕ (по Панченкове) у чоловіків 1-10 мм / год, у жінок - 2-15 мм / год. Збільшення ШОЕ відзначають при запальних, пухлинних захворюваннях, ревматизмі, гострий лейкоз, мієломної хвороби, анеміях, гломерулонефриті, уремії. Зменшення ШОЕ відзначають при еритреми, серповидноклітинної анемії, опіках, холері, вроджених вадах серця та ін
Зображення на початку статті взято с.