Біохімічні методи ідентифікації бактерій

Біохімічні методи ідентифікації бактерій. Здатність до ферментації вуглеводів у бактерій. Строкатий ряд при діагностиці бактерій. Розщеплення білків бактеріями.

Методів, використовуваних для ідентифікації особливостей метаболізму бактерій. дуже багато, але на практиці застосовують невелику їх кількість. Більшість способів засноване на використанні диференційно-діагностичних середовищ, що включають різні індикатори.

Здатність до ферментації вуглеводів у бактерій

Здатність до ферментації вуглеводів у бактерій оцінюють по зміні забарвлення середовища внаслідок утворення органічних кислот (відповідно, відбувається зменшення рН), що викликають зміну забарвлення індикатора.

Скляні поплавці при діагностиці ферментації вуглеводів у бактерій

Для визначення сахаролитической активності застосовують середовища Хісса; в їх склад входять 1% пептонна вода (або МПБ), індикатор Андраде і один з вуглеводів. При розщепленні вуглеводу відбувається зміна кольору середовища з жовтого на червоний. Оскільки бактерії розрізняють за здатністю ферментувати ті чи інші вуглеводи, то ряди пробірок набувають строкатого вигляду. Тому цей набір середовищ і називають «строкатий» (або кольоровий) ряд.

Скляні поплавці при діагностиці ферментації вуглеводів у бактерій. Для визначення здатності мікроорганізмів ферментувати вуглеводи з утворенням кислоти і газу в судини із середовищами вносять скляні поплавці (зупинено з одного кінця короткі трубочки), спливаючі після наповнення їх газом.

Розщеплення білків бактеріями

Деякі бактерії проявляють протеолітичну активність, виділяючи протеази, що каталізують розщеплення білків. Наявність протеолітичних ферментів з групи коллагеназ визначають при посіві уколом в МТЖ. При позитивному результаті спостерігають його розрідження у вигляді воронки або пошарово зверху вниз. Здатність до розщеплення білків і амінокислот також можна оцінювати по зміні забарвлення середовища, тому що утворюються продукти - аміак, індол і сірководень - зрушують рН в лужну сторону, викликаючи зміну забарвлення індикатора.

Освіта аміаку бактеріями. Для визначення здатності до утворення NH3 проводять посів у МПБ, і між його поверхнею і пробкою закріплюють смужку лакмусового паперу. При позитивному результаті папірець синіє. Освіта індолу і H2S. Зазвичай для визначення здатності до утворення індолу і сірководню також проводять посів у МПБ, між його поверхнею і пробкою закріплюють папірці: в першому випадку просочені розчином щавлевої кислоти (при утворенні індолу папірець червоніє), у другому - розчином ацетату свинцю (при утворенні H2S папірець чорніє ). Також використовують спеціальні середовища, що містять індикатори (наприклад, середа Кліглера), або їх вносять безпосередньо в середу після реєстрації видимого росту бактерій (див. Також рис. 18-2, А).