Чутливість бактерій до антибактеріальних препаратів і бактеріофагів
Визначення чутливості бактерій - важлива частина лікування бактеріальних інфекцій, оскільки ця процедура дозволяє підібрати для лікування максимально ефективні антибіотики або бактеріофаги. Так можна з'ясувати, на які речовини колонії бактерій. вирощені in vitro, реагують припиненням зростання або загибеллю.
Споріднені види бактерій мають деякий природний діапазон чутливості до антибактеріальних препаратів або їх групам. Більшість бактеріальних клітин мають середньостатистичну чутливість, що характеризує колонію. Однак при тривалому вирощуванні на середовищах, що містять речовини, що пригнічують ріст і розвиток бактеріальних колоній, чутливість деяких бактерій на антибіотики знижується, а згодом за допомогою маленьких кільцевих ДНК (плазмід) передається всім бактеріальним клітинам. Так виникають нечутливі штами, що доставляють масу клопоту лікарям.
Зниження чутливості бактерій до антибактеріальних препаратів часто виникає при тривалому нерегулярному прийомі антибіотиків. В такому випадку визначення чутливості бактерій на антибіотики стає обов'язковим етапом, що передує ефективному лікуванню.
Сучасні бактеріальні культури часто демонструють високу стійкість до бета-лактамних антибіотиків, таким як цефалоспорини і пеніциліни. Це пов'язано з тим, що такі бактерії, як Klebsiella pneumoniae. Escherichia coli і Pseudomonas aeruginosa здатні синтезувати спеціальні ферменти, названі бета-лактамазами розширеного спектру (БЛРС).
Розрізняють два способи призначення антибіотиків і фагів:
- Емпіричне спирається на інформацію про природну чутливості мікроорганізмів до антибактеріальних препаратів або бактеріофагів, на дані епідеміологів і наявні дані попередніх клінічних досліджень.
- Етіотропне засноване на інформації про реальну чутливості культур, отриманих з інфекційних вогнищ до антибактеріальних препаратів, які планується призначати для лікування.
Варіанти взаємодії бактерій і лікарських препаратів
Поняття чутливості бактерій до антибактеріальних препаратів у мікробіологів і лікарів трохи різні. Це пов'язано з тим, що концентрації речовин, допустимі при дослідженні висіяних культур, можуть істотно перевищувати ті, які допустимі для живих організмів. Розрізняють три види чутливості бактерій до антибактеріальних препаратів:
- Чутливі. Реагують припиненням зростання на стандартні дози лікарських речовин.
- Стійкі, або резистентні. Чи не реагують навіть на максимальні дози лікарських речовин.
- З проміжної резистентністю до лікарських препаратів. Іноді такі штами відносять у стійким. Їх особливістю є здатність припиняти зростання в тих частинах організму, де відбувається накопичення лікарських речовин, і не реагувати на антибіотики в інших частинах організму. Деякі з таких штамів припиняють зростання тільки при застосуванні максимально допустимих концентрацій антибіотика.
Важливою характеристикою антибіотика є так звана мінімальна бактерицидна концентрація. Це така концентрація, яка здатна протягом певного часу зменшити чисельність бактерій в колонії на 99,9%. Її застосовують в особливих випадках - у хворих на остеомієліт, бактеріальним ендокардитом, при генералізованих інфекціях, що виникають у хворих зі зниженим імунітетом.
методи визначення
Визначення чутливості бактеріальних культур до лікарських препаратів може проводитися як в рідких, так і в щільних середовищах. Частіше за інших застосовуються три методи.
Диско-дифузійний
Для його проведення використовуються диски, змочені розчинами антибіотиків стандартних концентрацій (вибираються заздалегідь відомі середні терапевтичні дози). Вони підбираються так, щоб розміри ділянок уповільнення зростання бактерій знаходилися відповідно до прийнятих міжнародних стандартів.
Вирощування бактерій проводиться на твердих середовищах (агар Мюллер-Хинтона або АГВ). На них висівається суспензія бактерій, а потім кладуть паперові диски, змочені різними антибактеріальними агентами. Після цього чашки витримуються в термостаті. Визначення чутливості виконують візуально, за наявністю зон уповільнення зростання близько дисків. Вимірюють їх діаметри і за таблицями розраховують ступінь чутливості бактеріальної культури до конкретних антибактеріальних препаратів. Даний метод непридатний до речовин, погано проникає в товщу агару (поліміксину, ристомицина) і не дозволяє провести визначення мінімальної переважної дози антибіотика.
Метод послідовних розведень
Складається в підготовці поживних середовищ, що містять різну кількість антибіотика. Їх розливають в різні чашки Петрі, кожну з яких зовні поділяють на сектори за допомогою маркера. На кожен сектор наносять різні культури за допомогою спеціальної петлі або аплікатора. У кожну чашку можна за один раз посіяти 10-15 культур. Чашки культивують в термостаті. Контрольну чашку заливають агаром без антибіотика.
Визначення чутливості цим методом дає можливість виявити мінімальні кількості антибіотика, повністю пригнічують ріст бактерій.
Комбінований, або метод Е-тестів
Визначення чутливості за допомогою смужок паперу з градієнтом концентрацій. Смужки розміщують на чашці Петрі рівномірно і за ступенем пригнічення росту в різних ділянках визначають не тільки чутливість культури до препаратів, а й їх мінімальні концентрації, що викликають появу характерних еліпсоїдних зон затримки росту.
Існують стандартні набори антибіотиків, призначені для роботи з грампозитивними і грамнегативними бактеріями, а також розширені набори для дослідження сечі, до складу яких входять додаткові речовини - уросептики.
Бактеріофаги і лікування бактеріальних інфекцій
Препарати-бактеріофаги - віруси, що вражають бактеріальні клітини, - часто доповнюють антибіотикотерапію. Вони володіють необхідною специфічністю і викликають лізис (розчинення) бактеріальних клітин-мішеней. Чутливість бактеріальних культур до фагів дуже сильно варіює, тому її визначення є запорукою ефективної фаготерапіі.
Питання природи чутливості бактерій до бактеріофагу давно цікавив біологів різних напрямків. Існувала версія, що поява нечутливих клітин відбувається тільки після контакту колонії з фагами (так звана ламарковскую версія). Інша версія, дарвіновська, передбачала, що поява фагів модулює чисельність колонії, даючи перевагу предсуществовавшім клітинам з випадковими мутаціями, стійким до бактеріофагів.
різновиди фагів
Розрізняють дві групи бактеріофагів в залежності від швидкості знищення бактеріальних колоній.
Знищують тільки деякі бактеріальні клітини, вступаючи з вижили в своєрідний симбіоз. ДНК такого бактеріофага вбудовується в ДНК бактерії (так званий профаг) і передається майбутнім бактеріальним поколінням. Такі культури бактерій називають Лізогенія - в певний момент вони дають життя новим вільним бактеріофагів, які переходять з нуклеоида в цитоплазму і здатні лизировать бактерії сусідніх колоній. При цьому чутливість до бактеріофагу у лізогенной колонії відсутня.
вірулентні
Лизируют все бактеріальні клітини, даючи життя новим фагів, які знищують колонію протягом 30-40 хвилин, після чого частково гинуть, а частково инкапсулируются і переходять в сплячий стан.
Як визначають чутливість до фагів
Визначення чутливості бактеріальних культур до бактеріофагів проводять за допомогою мікробіологічних методів - на твердих або напіврідких поживних середовищах. Зазвичай використовують один моновалентний і два полівалентних фага.
Визначення чутливості колоній до бактеріофагу може використовуватися для різних цілей:
- Фаготіпірованіе. Визначення штамів бактерій за їх чутливості до фагів. Використовується при проведенні епідеміологічних досліджень.
- Фагоідентіфікація. Визначення видів бактерій по їх відношенню до фагів.
- Фагодіагностіка. Виділення фагів з організму пацієнта, що свідчить про наявність відповідних бактерій.
- Фагопрофілактика. Застосовується при небезпеці зараження дизентерією. Чутливість збудників до фагів дозволяє проводити ефективну профілактику в осередках цього захворювання.
- Фаготерапія. Найбільш часто застосовується для лікування захворювань, викликаних стафілококом, шигеллами, протеєм.
Застосування бактеріофагів показано тільки в разі, якщо виконано визначення чутливості до бактеріофагу, інакше цей дорогий метод може не дати очікуваного ефекту. Такі препарати використовують для лікування інфекцій у новонароджених, гнійних ран, а також інфекцій сечовивідної системи - уретритів, пієлонефритів, циститів.
У Вашому організмі живуть паразити?
У повсякденному житті так легко "підчепити" паразитів, адже контакт з ними просто неминучий, особливо якщо ви часто користуєтеся громадським транспортом, відвідуєте людні місця, та й просто перебуваєте на вулиці.
Симптомами появи паразитів в організмі можуть бути:
- часті застуди, ОРЗ, хвороби горла, кашель;
- алергія, що не припиняється нежить, почервоніння очей;
- шкірна алергія, свербіж, екземи;
- бородавки і папіломи;
- головні болі, а також різні болі і спазми у внутрішніх органах.
Унікальне засіб, від якого груди ростуть як на дріжджах Детальніше.
Все папіломи і бородавки йдуть за 14 днів, якщо змастити їх простим. Детальніше.
Все папіломи і бородавки йдуть за 14 днів, якщо змастити їх простим.
